AAT Bioquest  21225  Cell Meter™ 熒光吞噬作用檢測(cè)試劑盒 *紅色熒光*

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AAT Bioquest 熒光吞噬作用檢測(cè)試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國(guó)AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助 quan 世 jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  21225  Cell Meter™ 熒光吞噬作用檢測(cè)試劑盒 *紅色熒光*  100 Tests，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號(hào)：21225

產(chǎn)品名稱：Cell Meter™ 熒光吞噬作用檢測(cè)試劑盒 *紅色熒光*

產(chǎn)品規(guī)格：100 Tests

AAT Bioquest 熒光吞噬作用檢測(cè)試劑盒-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest  21225  Cell Meter™ 熒光吞噬作用檢測(cè)試劑盒 *紅色熒光*  100 Tests，產(chǎn)品說(shuō)明：

吞噬作用被定義為細(xì)胞對(duì)等離子膜包膜內(nèi)的顆粒的細(xì)胞吸收。吞噬過(guò)程在吞噬和破壞入侵微生物的先天免疫反應(yīng)中至關(guān)重要。吞噬作用也需要通過(guò)清除凋亡體來(lái)維持組織穩(wěn)態(tài)和重塑。吞噬作用的攝取機(jī)制取決于顆粒的大小、受體-配體相互作用和細(xì)胞骨架的受累。一旦內(nèi)化，吞噬體與溶酶體融合形成次級(jí)吞噬溶酶體進(jìn)行消化，導(dǎo)致pH值逐漸降低。我們的細(xì)胞計(jì)™熒光吞噬檢測(cè)試劑盒采用 du te 的 pH 依賴性 Protonex™ 600 紅乳膠珠偶聯(lián)物。珠子處于即用型懸浮液中。與大多數(shù)現(xiàn)有的熒光染料不同，Protonex™ 600 Red-乳膠珠偶聯(lián)物在細(xì)胞外是無(wú)熒光的。然而，當(dāng)它們位于酸性吞噬體/吞噬溶酶體內(nèi)時(shí)，其熒光顯著增加。這一特性使其易于使用，無(wú)需臺(tái)盼藍(lán)淬滅步驟，是研究吞噬作用及其法規(guī)的可靠工具。細(xì)胞計(jì)™熒光吞噬測(cè)定試劑盒還包括一種綠色熒光細(xì)胞活力染料，可通過(guò)熒光顯微鏡同時(shí)檢測(cè)活細(xì)胞和吞噬過(guò)程。該測(cè)定法也適用于熒光酶標(biāo)儀和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)。

平臺(tái)

熒光顯微鏡

推薦板：黑色墻壁/透明底部

儀器規(guī)格：德州紅/FITC過(guò)濾器

組件

組分 A：質(zhì)子 600 紅乳膠珠偶聯(lián)物—1 瓶 （15 μL）

組分B：細(xì)胞痕量™綠—1瓶

組件C：DMSO—1 瓶 （100 μL）

1.    平板細(xì)胞

2.    添加 12.5 μL Protonex™ 600 紅乳膠珠偶聯(lián)物

3.    在37°C孵育4小時(shí)

4.    添加 12.5 μL 細(xì)胞痕量™綠色

5.    在37°C孵育30分鐘

6.    使用德州紅和FITC濾光片通過(guò)顯微鏡監(jiān)測(cè)熒光

重要事項(xiàng)：在開始實(shí)驗(yàn)之前將所有試劑盒組分解凍至室溫。

儲(chǔ)備溶液的制備

除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

1. 質(zhì)子™ 600紅乳膠珠偶聯(lián)液（12X）

在 8 mL 細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基（含 600% FBS）中加入 2 μL Protonex 10 RedLatex™ 微球偶聯(lián)物（組分 A）。

注意未使用的珠子可以儲(chǔ)存在4°C。

2. 細(xì)胞痕量™綠色儲(chǔ)備液 （400X）

將 20 μL DMSO（組分 C）加入小瓶中的 CytoTrace™ Green（組分 B）中，并充分混合。

注意 未使用的CytoTrace™綠色DMSO儲(chǔ)備溶液可以等分到一次性小瓶中并儲(chǔ)存在-20°C。

工作溶液的制備

細(xì)胞痕量™綠色工作溶液（12X）

在 5 mL 細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加入 400 μL CytoTrace™ Green 儲(chǔ)備溶液 （2X），并充分混合。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

1.    向每個(gè)孔中加入 25 μL 6X 細(xì)胞松弛素 D 作為陽(yáng)性對(duì)照或測(cè)試化合物。

注意測(cè)定中使用的細(xì)胞松弛素D的濃度應(yīng)針對(duì)每個(gè)單獨(dú)的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化。

2.    將板在細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育30分鐘。

3.    向每個(gè)孔中加入 12.5 μL Protonex™ 600 紅乳膠珠偶聯(lián)液 （12X）。

4.    將板在細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育4小時(shí)。

注意 用戶應(yīng)針對(duì)每個(gè)單獨(dú)的細(xì)胞系優(yōu)化孵育時(shí)間。

5.    向每個(gè)孔中加入 12.5 μL CytoTrace™ Green 工作溶液 （12X）。

6.    將板在細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育30分鐘。

7.    用1X PBS清洗盤子兩次。

8.    用德克薩斯紅濾光片（Ex / Em = 570 / 600 nm）和CytoTrace™ Green用FITC濾光片（Ex / Em = 490 / 525 nm）觀察細(xì)胞內(nèi)的吞噬作用。

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